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        雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒

        • 產(chǎn)品型號(hào):BS-4386
        • 產(chǎn)品時(shí)間:2024-09-23
        • 簡要描述:雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒本生生物公司供應(yīng):ELISA試劑盒,熒光定量PCR耗材,移液器吸嘴,微量離心管,進(jìn)口凍存管,細(xì)胞培養(yǎng)皿,培養(yǎng)板,培養(yǎng)瓶,吸頭,儀器及手套,色譜耗材,針頭過濾器。
        • 產(chǎn)品簡介

        雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫分析 試劑盒使用說明書

        本試劑盒僅供研究使用。

        檢測范圍:

        96T

        0.5pg/ml-35pg/ml

        使用目的:

        本試劑盒用于測定雞血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)含量。

        實(shí)驗(yàn)原理

        本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標(biāo)本中雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗抗原,往包被單抗的微孔中依次加入腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab),再與 HRP 標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)濃度。

        雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒試劑盒組成

        130 倍濃縮洗滌液

        20ml×1 瓶

        7終止液6ml×1 瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1 瓶

        8標(biāo)準(zhǔn)品(64pg/ml)

        0.5ml×1 瓶3

        酶標(biāo)包被板12 孔×8 條

        9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1 瓶

        4樣品稀釋液

        6ml×1 瓶10

        說明書1 份

        5顯色劑 A 液

        6ml×1 瓶11封板膜2 張

        6顯色劑 B 液

        6ml×1/瓶12

        密封袋1 個(gè)

        標(biāo)本要求

        1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

        2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

        操作步驟

        1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

        32pg/ml5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

        150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

        16pg/ml4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

        150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

        8pg/ml3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

        150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

        4pg/ml2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

        150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

        2pg/ml1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

        150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

        2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、

        待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品最終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡

        量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

        3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

        4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

        5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。

        6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

        7.溫育:操作同 3。

        8.洗滌:操作同 5。

        9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

        10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

        11.測定:以空白孔調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止

        液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

        雞腸炎沙門氏菌抗體(SE-Ab)酶聯(lián)免疫試劑盒操作程序總結(jié):

        計(jì)算

        以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的

        OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD 值計(jì)算出標(biāo)

        準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

        注意事項(xiàng)

        1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未

        用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

        2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

        3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好

        控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

        4. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值

        大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的 OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計(jì)

        算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

        5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

        6.底物請(qǐng)避光保存。

        7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

        8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

        9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

        保存條件及有效期

        1.試劑盒保存:;2-8℃。

        2.有效期:6 個(gè)月

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